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    体外哺乳动物细胞基因突变试验仪

    产品时间:2025-04-30

    简要描述:

    体外哺乳动物细胞基因突变试验仪
    本试验用于检测受试物对体外培养的哺乳动物细胞的基因突变作用,包括碱基对突变、移码突变和缺失等,从而评价受试物引起突变的可能性

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    体外哺乳动物细胞基因突变试验仪

    体外哺乳动物细胞基因突变试验仪

    一、 仪器介绍

    实验目的:

    本试验用于检测受试物对体外培养的哺乳动物细胞的基因突变作用,包括碱基对突变、移码突变和缺失等,从而评价受试物引起突变的可能性

    实验概述:

    本试验属正向突变试验,可检出碱基置换型致突变物和移码型致突变物。在加入和不加入代谢活化系统的条件下,使细胞暴露于受试物一定时间,然后将细胞传代培养。胸苷激酶水平正常的细胞对(trifluorothymidine,TFT)等敏感,因而在培养液中不能生长分裂,突变细胞则不敏感,在含有的选择性培养液中能继续分裂并形成集落。相似的核糖基酶(HPRT)正常的细胞对 6-硫代(6-thioguanine,6-TG)敏感,突变的细胞则不敏感,在含有 6-硫代的选择性培养液中可生长形成集落?;谕槐浼涫?/span>,计算突变频率以评价受试物的致突变性。

    应用范围

    应用于科研、农业、卫生、教育、雾霾状态可吸入颗粒染毒效果研究等各个领域

    符合标准:

    GB/T 15670.20-2017《农药登记毒理学试验方法第20部分:体外哺乳动物细胞基因突变试验》

    二、试验流程

    1)细胞培养:

    选择合适细胞系(如L5178Y、CHO),常规传代培养

    2)受试物处理:

    暴露于不同浓度受试物(需设阴性/阳性对照)

    3)表达期:

    预留足够时间(通常7-10天)使突变表型显现。

    4.)突变体筛选:

    TK试验:使用(TFT)筛选TK突变体。

    HPRT试验:使用6-硫代(6-TG)选HPRT突变体。

    5)克隆形成分析:

    计数突变集落,计算突变频率(突变集落数/存活细胞数)

    6)数据统计:

    与对照组比较,判断突变率是否显著增加。

    三、注意事项

    1)细胞活力控制:受试物浓度需保证细胞存活率(通常>50%

    2)代谢活化系统:需加入S9混合物(模拟体内代谢,(如Aroclor 1254诱导的大鼠肝S9)。

    3)假阳性/阴性:避免pH、渗透压等非特异性因素干扰。

    4)合规性:   遵循国际指南(如OECD 490、ICH S2R1)。

    计算:

    体外哺乳动物细胞基因突变试验仪

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